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                                      長恒榮創顯微鏡 > 技術文章 > 熒光顯微鏡常用的激發光源
                                      熒光顯微鏡常用的激發光源
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                                      北京長恒榮創科技

                                      時間 : 2021-02-02 20:44 瀏覽量 : 158

                                          熒光顯微鏡常用的激發光源為:

                                          A、普通白熾燈B、紫外燈C、高壓汞燈D、氖燈E、鹵素燈

                                          正確答案:C

                                          熒光顯微鏡分析中常用激發光源的種類

                                          在熒光分析中常用汞燈作激發光源,根據汞蒸氣壓的不同可分為低壓汞燈和高壓汞燈:

                                          熒光顯微鏡常用的激發光源-汞燈

                                          超高壓汞燈(50-200W),它是用石英玻璃制作,中間呈球形,內充一定數量的汞,工作時由兩個電極間放電,引起水銀蒸發,球內氣壓迅速升高,當水銀完全蒸發時,可達50~70個標準大氣壓力,這一過程一般約需5~15min。超高壓汞燈的發光是電極間放電使水銀分子不斷解離和還原過程中發射光量子的結果。它發射很強的紫外和藍紫光,足以激發各類熒光物質,因此,為熒光顯微鏡普遍采用。

                                          推薦產品:歐司朗50W,103W,200W汞燈,適用于各大廠家高端熒光顯微鏡;一般200小時壽命,最長400小時

                                          低壓汞燈:汞蒸氣,可發射出很強波長的射線,壽命很長,可長時間連續工作,射線對眼睛有害,不眼睛時不可長時間注視。

                                          高壓汞燈:又叫高強度紫外線燈,汞蒸氣為1-數個大氣壓,可見炮區的譜線增強,在紫外光區,波長為365nm的光線更強。

                                          中壓汞燈:可以發射一系列汞線組成的不連續光譜,除254nm波長以外,多數譜線都可作為校正波長使用。此外,還有超高壓汞燈、汞-氙燈、汞-鋅燈等。

                                          熒光顯微鏡常用的激發光源-氫灑和氘燈

                                          前者是燈泡中加氫蒸氣,經閉合放電產生160-350nm波長的光,氫朋激發態返回的基態時,就發射了氫的連續光譜,在160nm以下為線樂譜,氫燈和氘燈性能相同,其壽命也比氫燈長,因玻璃吸收紫外線,故燈殼要用石英制作,或在燈泡出光處開一石英窗,此光源適用于紫外光區的測定。

                                          熒光顯微鏡常用的激發光源-氙燈

                                          光的輻射能強度很高,它可在220-1100nm之間發射很強的連續光譜,可用于紫外區,可見光及近紅外區的測定,雖其輻射范圍廣,使用中在生產高熱的同晨有臭氧味,其壽命短,燈泡內壓較大,如日立牌650-60型熒光分光光度計,氙燈平時約有7個大氣壓,點燃后可達30個大氣壓,故使用進應注意。

                                          1、按裝緊固螺絲時用力應均勻,勿成扭力,以免燈泡破裂爆炸。

                                          2、勿用手觸及燈泡,以防受熱不均破裂。

                                          3、如燈泡有油污,應用雞皮藮酒精輕擦,不能用布、棉花等物擦拭。

                                          氙燈和汞燈做為白光源,都能提供從紫外到近紅外一系列波長的光,但它們卻有著不同的激發光譜。汞燈集中在近紫外、藍光以及綠光附近,這種在峰值的高激發能量確保產生明亮的熒光信號,但光毒性卻很強。因此,HBO用來對固定樣品或弱熒光成像。相比而言,氙燈光源的激發比較平緩,可以用于不同波長間強度的比較,例如用于鈣離子濃度測量等。氙燈的強激發在近紅外800-1000nm。

                                          XBO較HBO的特點:

                                          1)光譜強度更均勻

                                          2)在紅外及中紅外仍有較強光譜強度

                                          3)能量較強更易到達物鏡后孔徑

                                          推薦產品:XBO75W,100W氙燈;壽命一般400小時,1200小時

                                          熒光顯微鏡常用的激發光源-金屬鹵素燈

                                          這是近年來出現的一種光源,它和汞燈的激發光譜很像,但它和顯微鏡以光纖相連,能散熱,壽命更長。光纖從光源連到顯微鏡上,可以大量減少光產生的熱能。金屬鹵素燈對活細胞成像的另一個優勢是內置強度設計裝置,可以容易調節激發光。

                                          推薦產品:EXPO公司X-cite光源,120W,適用于各大廠家高端熒光顯微鏡;壽命2500小時以上。

                                          熒光顯微鏡常用的激發光源-LED

                                          近來,還出現了一種新的熒光光源:LED,這種光源的開關在毫秒間,減少樣品在光照下的暴露時間,延長壽命。另外,LED光的衰減即快又精確,長期活細胞試驗下可大大減少光毒性。和白光相比,LED僅僅在一個較窄的光譜激發,多個LED波段使得LED光源能為多色熒光提供應用。

                                          推薦產品:蔡司Colibri,壽命普遍在幾千個小時。

                                          熒光顯微鏡的使用注意事項是哪些?

                                          熒光顯微鏡是由生物顯微鏡和落射熒光裝置組成,廣泛應用于生物學、材料科學等領域。常規的配置B、G、BV、V、U五個波段可轉換,還可同時進行常規透射觀察。和常規的顯微鏡一樣,操作時,需輕拿輕放。在調整光源時應戴上防護眼鏡。熒光顯微鏡光源壽命有限,標本應集中檢查,以節省時間,保護光源。燈熄滅后欲再用時,須待燈泡充分冷卻后才能點燃。中應避免數次點燃光源。

                                          如何更換顯微鏡的燈泡?

                                          更換顯微鏡的燈泡,步驟如下:

                                          1.把顯微鏡仰倒。然后,拉出鏡架下面的燈室旋鈕,打開燈室蓋。

                                          2.隔著包裝袋握住燈泡,不要在燈泡上留下指紋。將觸腳完全插入燈座。正確安裝后,拉掉聚乙烯包裝袋。

                                          3.將燈室旋鈕保持拉出狀態,蓋上燈室蓋。然后推進燈室旋鈕,鎖住燈室蓋。

                                          需要注意的是:始終使用指定燈泡。使用其他燈泡有可能導致著火,不要用手觸摸燈泡,如果偶然不小心在燈泡上留下指印,用一塊無毛軟布蘸一些酒精擦凈。使用被污染的燈泡會縮短燈泡使用壽命。

                                          LED熒光顯微鏡光源介紹

                                          在LED前,熒光顯微鏡常用光源為高壓汞燈,在LED激發光源普遍后,就成為熒光顯微鏡的主要光源。LED發射的單色光位于相對較窄的光譜帶中,半高寬約為10nm-40nm,相對于高壓汞燈,LED激發光源有幾個重要優勢:1)額定使用壽命可達3000小時以上,遠遠超過其他光源;2)整個額定使用壽命期間,其輸出強度保持相對穩定,確保激發;3)LED啟動和關閉時間短,即開即用,不需要預熱;4)LED光效高,且亮度連續可調;5)體積小、輕便,且為冷光源,彌補汞燈的大功率、發熱、使用復雜燈問題,大大的降低了熒光顯微鏡使用成本并提高熒光顯微鏡操作的簡便性。

                                          對于熒光顯微鏡來說,尤其是單色激發的熒光顯微鏡,LED具有非常大的吸引力,例如B波段激發的熒光探針FLTC/GFP標記的樣板,在藍光LED激發下了可以獲得非常好的圖像,而廣泛應用于免疫熒光檢測領域。多波段LED光源可選,并可控制每一個LED的亮度,可以實現多波長的選擇激發,便捷。熒光色:365nm紫光;395nm純藍;455nm藍綠色;505nm綠色:;530nm純綠色;590nm黃色;630nm紅色,更多關于多波段LED顯微鏡熒光激發光源SL169,


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